14-3-3蛋程中的互作靶蛋白鉴定及其对外源激素的响应

【目的】籽粒灌浆对水稻产量及品质的形成至关重要。14-3-3蛋白是一种信号转导调节因子,在植物生长发育中发挥着重要调控作用。本研究通过分析14-3-3蛋白家族在籽粒灌浆过程中的基因表达模式及其互作靶蛋白,从而揭示其在籽粒灌浆过程中的功能。【方法】利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术分析水稻14-3-3基因家族在籽粒灌浆过程中的表达变化模式,并从中选取GF14b及GF14e进行后续的蛋白功能分析。利用KEGG数据库对GF14b及GF14e蛋白功能motif位点进行分析;构建GST-GF14b及GST-GF14e表达载体,利用亲和层析技术分别钓取籽粒中与GF14b及GF14e互作的靶蛋白,并借助LC-MS/MS对靶蛋白进行鉴定。采用GST pull-down方法验证靶蛋白与GF14b及GF14e间的蛋白互作关系。利用Kinasephos在线程序对靶蛋白的Ser和Thr磷酸化位点进行预测;采用MapMan 3.6.0软件对靶蛋白的功能及参与的代谢过程进行分析。在籽粒灌浆期（花后15 d）,分别喷施25×10^-6mol·L^-1 ABA,10×10^-6mol·L^-1 IAA,100×10^-6mol·L^-1 GA,50×10^-6mol·L^-1 ZR和 2×10^-4mol·L^-1 BR,研究外源激素处理对籽粒灌浆过程中GF14b,GF14e及其互作靶基因表达的影响。【结果】14-3-3家族基因中,除GF14h外,其余7个家族成员在水稻籽粒中均有表达,其中GF14b及GF14e在籽粒灌浆过程中的表达水平较高且变化幅度较大。通过蛋白序列分析发现,GF14b与GF14e间具有3个相同,2个差异的motif功能位点。通过亲和层析试验,在籽粒中共鉴定到59个与GF14b和72个与GF14e互作的靶蛋白,其中有43个靶蛋白与2个成员均有互作,分别有16个和29个靶蛋白与GF14b和GF14e特异结合。随机选取2个靶蛋白进行体外蛋白互作验证,结果表明靶蛋白SUS3与GF14b和GF14e均存在互作关系,而靶蛋白PSA仅与GF14e有相互作用关系,验证了亲和层析结果的准确性。蛋白功能的分析表明,GF14b和GF14e通过与靶蛋白的结合,共同参与了籽粒灌浆过程中蔗糖转化、淀粉合成、糖酵解、TCA循环等碳代谢途径。同时,GF14b及GF14e还具有特异的调控功能,其中GF14b与核酸代谢及物质转运密切相关,而GF14e与C1代谢中的关键蛋白存在互作。此外,大部分靶蛋白均鉴定到具有潜在的Ser和Thr磷酸化位点。外源激素处理下,籽粒中GF14b和GF14e上调表达,而与淀粉合成代谢相关的靶基因（SUS2、 AGPS、AGPL、PPDK2、SBE）大部分呈下调表达的趋势。【结论】14-3-3基因家族成员GF14b和GF14e在水稻籽粒灌浆过程中的表达变化幅度较大,且会响应激素浓度的改变,并通过蛋白互作的形式负调控淀粉合成代谢相关基因的表达,从而对水稻籽粒淀粉的合成起到重要的调控作用。     

不同基质配比对盆栽香菜生长及品质的影响

以“大叶香菜”为试验材料,设置T1（草炭∶蛭石∶珍珠岩=3∶1∶1）、T2（草炭∶蛭石∶珍珠岩∶有机肥=6∶1∶1∶2）、T3（草炭∶蛭石∶有机肥=3∶1∶1）、T4（草炭∶蛭石∶珍珠岩∶有机肥=2∶1∶1∶1）、T5（草炭∶蛭石∶珍珠岩∶有机肥=1∶1∶1∶1）和T6（草炭∶蛭石∶有机肥=2∶1∶1）共6种基质配比种植盆栽香菜,研究不同基质配比对盆栽香菜生长及品质的影响。结果表明,T4处理的盆栽香菜茎粗、根长和根体积等生长指标优于其他处理,全株鲜质量相对较大,为2.854 g,全株干质量具有最大值,为0.384 g。T4处理的品质指标可溶性蛋白含量、维生素C含量和叶绿素含量也相对较高,分别为37.78、0.20和2.02 mg/g。因此,建议使用草炭∶蛭石∶珍珠岩∶有机肥=2∶1∶1∶1的基质配比进行盆栽香菜的种植。      

A Cathepsin B Inhibitor,E-64, Improves the Preimplantation Development of Bovine Somatic Cell Nuclear Transfer Embryos

Bovine somatic cell nuclear transfer (SCNT) is an important and powerful tool for basic research and biomedical and agricultural applications, however, the efficiency of SCNT has remained extremely low. In this study, we investigated the effects of cathepsin B inhibitor (E-64) supplementation of culture medium on in vitro development of bovine SCNT embryos. We initially used three concentrations of E-64 (0.1, 0.5, 1.0 μm), among which 0.5 μm resulted in the highest rate of blastocysts production after in vitro fertilization (IVF), and was therefore used for further experiments. Blastocyst development of SCNT embryos in the E-64 treatment group also increased relative to the control. Moreover, the cryosurvival rates of IVF and SCNT blastocysts were increased in E-64 treatment groups when compared with the control. On the other hand, we found that IVF and SCNT blastocysts derived from E-64-treated groups had increased total cell numbers and decreased apoptotic nuclei. Furthermore, assessment of the expression of apoptosis-related genes (Bax and Bcl-xL) in bovine IVF and SCNT blastocysts treated with E-64 by real-time RT-PCR analysis revealed suppressed expression of the pro-apoptotic gene Bax and stimulated expression of the anti-apoptotic gene Bcl-xL. Taken together, these finding indicate that addition of E-64 to embryo culture medium may have important implications for improving developmental competence and preimplantation quality in bovine IVF and SCNT embryos.     

上海市滩涂冬季底栖硅藻种类组成和生态分布

报道了上海市滩涂冬季底栖硅藻的种类组成、生态特征和数量分布情况。样品于2005年12月从7个站点中采集。经处理、镜检观察,从中鉴定出硅藻有90个分类单位,包括64种和22变种2变型(有两个未定种名),分别隶属于2纲6目9科27属。从水体咸度来看,淡水种类最多,为52个分类单位,占总数的57.78%;从温度性质来看,广温种占优势,有65个分类单位,占72.22%;从生活习性来看,底栖种占优势,有77个分类单位,占87.5%。数量分析表明,底栖硅藻细胞丰度变化为6.25×106~16.25×106cells/m2,平均为10.43×106cells/m2,在吴淞口站点含量最高。优势种为肘状针杆藻尖喙变种、斯氏布纹藻、膨胀桥弯藻和卵形双菱藻等,它们在各站点中都有分布,分别占总数的13.42%、12.56%、14.00%、9.88%。     

西瓜未授粉子房的离体培养

为了探讨西瓜未授粉子房诱导率的影响因素,以‘早春红玉’、‘西农9号’和‘小绿皇’为供试材料进行西瓜未授粉子房的离体培养,研究供体植株的黑暗热激处理、基因型、不同取样时间、2,4-D浓度和不同激素浓度组合等因素对其芽点诱导率的影响。结果表明:西瓜未授粉子房离体培养以33℃的条件下黑暗热激4 d效果最佳;以开花前1 d的子房诱导率最高为17.2%;3个品种中仅‘早春红玉’获得了再生植株,且在激素组合为4.0 mg·L-12,4-D+2.0 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1NAA时芽点率最高为15.0%;根据再生植株的根尖染色体数目,初步鉴定再生植株中有单倍体植株,还有二倍体和四倍体植株。     

不同粳稻品种(系)机插稻生态适应性生产力试验报告

选择参加2012年与2013年江苏省生产试验的粳稻品系,进行机插稻生态适应性生产力试验,分析不同品种生长特性、综合性状等,结果表明:南粳9108、武运粳24、淮稻14号、盐丰2号产量及综合性状优良,较适合高邮地区种植。     

不同立地条件下沙棘土壤水分分布特征及动态生长研究

为探究不同立地条件下沙棘土壤水分分布特征和生长情况,采用样地试验,设置2种坡向（阴坡、阳坡）和3种坡位（坡顶、坡中、坡底）进行研究。研究表明：（1）各样地内的土壤水分季节变化可划分为消耗期（5—6月）、快速补充期（6—7月）和消退期（7—9月）,天然降水对土壤含水率影响较大;（2）各样地内的土壤水分垂直分布为土壤水分显著变化层（Cv>0.2）、土壤水分次变化层（0.2>Cv>0.1）和土壤水分相对稳定层（Cv<0.1）;（3）不同立地条件对土壤水分及植株的生长具有显著影响。阴坡土壤水分明显高于阳坡,土壤水分由坡顶向坡底呈递减趋势;沙棘的生长指标及存活率表现为阴坡>阳坡,不同坡位表现为坡底>坡中>坡顶。研究结果可为玛纳斯县前山地带沙棘造林提供参考和理论依据。     

直播稻生产概况与品种选育策略

近年,直播稻面积在我国迅速扩大。本文结合国内外直播稻生产概况,指出了直播稻在抗倒伏、出苗率、耐冷性、防治杂草以及生育期等方面存在的问题,提出了培育“生育期适中、抗倒伏、耐低温、耐低氧萌发”的适合直播的水稻新品种选育策略。     

不同贝母的指纹图谱鉴别研究

[目的]建立指纹图谱方法,区分与鉴别浙贝母、平贝母、川贝母药材.[方法]采用高效液相色谱法,蒸发光散射检测器.[结果]测定方法稳定可靠,3种贝母测定精密度、重复性RSD均小于5％,同时色谱峰均具有各自的特征性.[结论]该方法稳定可靠,可作为浙贝母、平贝母、川贝母区分与判定的有效途径.     

不同播期、密度和肥料对菜用板蓝根产量及品质的影响

为探索菜用板蓝根在毕节地区的优质高产栽培措施,通过田间试验研究菜用板蓝根不同播期、密度和氮钾肥施用量对产量及品质的影响。结果表明,在毕节地区,菜用板蓝根适宜播期为4月30日左右,种植密度为50．025～66．70万株/hm2,钾肥施用量为150～300 kg/hm2,氮肥施用量为778 kg/hm2左右,在此栽培条件下,产量可达73947．96～76749．35 kg/hm2,且品质较好,蛋白质、脂肪、水溶性糖及维生素含量较高,粗纤维含量较低。